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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)提高從大腸桿菌提取蛋白的產(chǎn)量

  發(fā)布時(shí)間:2009/2/26 點(diǎn)擊量:1314

大腸桿菌被廣泛應(yīng)用于蛋白表達(dá)的宿主。然而,重組蛋白的提取有賴(lài)于誘導(dǎo)細(xì)胞溶解的能力。若要準(zhǔn)確闡明任何生物體的蛋白質(zhì)組,必須將細(xì)胞有效溶解。細(xì)胞有效 溶解過(guò)程必須包括細(xì)胞壁或膜的物理破碎和確保所釋放蛋白可溶性的化學(xué)方法。超聲破碎和玻珠研磨機(jī)常被用于細(xì)胞裂解。然而,這兩種方法在處理過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生熱 量,這會(huì)導(dǎo)致尿素的快速水解和異氰酸的形成,進(jìn)而導(dǎo)致蛋白胺的氨基甲酰化,另外還會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員的健康造成威脅。壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)可以有效避免 上述不利條件,能夠有效裂解大腸桿菌細(xì)胞并提取大腸桿菌的蛋白。

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